HMG-I/HMG-Y CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402396

개요

HMGA1은 염색질의 구조를 형성하는 단백질인 HMG-I와 HMG-Y를 암호화하며, 이들은 AT-hook DNA 결합 인자로서 염색질 구조를 재구성해 전사, 복제, 그리고 상위 수준의 유전체 조직화를 조절합니다. HMGA1은 AT가 풍부한 조절 영역에 결합함으로써 인핸서오좀(enhanceosome) 조립을 촉진하고, 세포주기 조절, DNA 손상 반응, NF-κB 의존적 유전자 발현과 같은 염증 경로를 포함한 신호 연계 전사 프로그램에 영향을 미칩니다. HMGA1의 발현 또는 활성이 비정상적으로 조절되면 세포 가소성, 증식, 대사 적응이 변화하며, 종양성 전사 네트워크 및 종양 진행 맥락에서 빈번히 연구됩니다. 또한 HMGA1은 계통(lineage) 특이적 좌위에서 염색질 접근성에도 영향을 주므로, 후성유전적 조절과 스트레스 반응성 유전자 발현을 조사하는 데 유용한 핵심 노드로 활용됩니다.

HMG-I/HMG-Y CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 HMGA1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 HMGA1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 HMGA1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 HMG-I/HMG-Y 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 HMG-I/HMG-Y 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 HMGA1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• HMG-I/HMG-Y 기능에 중요한 HMGA1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 HMGA1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• HMG-I/HMG-Y CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 HMG-I/HMG-Y CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 HMGA1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  HMG-I/HMG-Y HDR 플라스미드 (h) 및 HMG-I/HMG-Y HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 HMGA1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 HMGA1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.