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Histone Deacetylase 4 (HDAC4) CRISPR 활성화 플라스미드(h) | sc-400388-ACT | 20 µg | $397.00 |
HDAC4는 히스톤 탈아세틸화효소 4(Histone Deacetylase 4)를 암호화하며, 세포외 신호를 전사 프로그램과 연결하는 신호 반응성 크로마틴 조절인자로 기능하는 IIa 계열 HDAC입니다. HDAC4는 칼슘/칼모듈린 의존성 키나아제와 기타 신호 입력에 반응하여 세포질과 핵 사이를 이동하며, 그 과정에서 히스톤 아세틸화 상태를 조절하고 MEF2와 같은 전사인자와의 상호작용을 통해 부분적으로 전사를 억제합니다. 이러한 기전을 통해 HDAC4는 세포 분화, 신경 및 근육 유전자 발현, 스트레스 반응, 그리고 후성유전학적 재구성의 조절에 관여합니다. HDAC4의 비정상적인 활성 또는 세포내 위치 조절 이상은 신경발달 및 신경퇴행 과정, 심장 리모델링, 암 관련 유전자 발현 변화와 연관된 병적 전사 상태에 관여하는 것으로 보고되었습니다.
Histone Deacetylase 4 (HDAC4) CRISPR 활성화 플라스미드(h)는 기본 DNA 서열을 변경하지 않고 내인성 HDAC4 발현을 상향 조절하는 표적화된 비파괴적 접근법을 제공합니다.
Histone Deacetylase 4 (HDAC4) CRISPR 활성화 플라스미드(h)는 인간 세포주에서 HDAC4 유전자좌의 고효율, 위치 특이적 전사 상향 조절을 위해 설계된 3개의 플라스미드로 구성된 시너지 활성화 매개체(SAM) 시스템입니다. 이 시스템은 DNA 결합 능력은 유지하면서 뉴클레아제 활성을 제거하는 두 가지 비활성화 돌연변이(D10A 및 N863A)를 지닌 촉매 활성 없는 Cas9(dCas9)을 중심으로 구축되었습니다. 이 dCas9은 강력한 전사 활성화제인 VP64와 융합되어 있으며, 선별을 위해 블라스티시딘 내성 유전자와 함께 발현됩니다. 두 번째 플라스미드는 dCas9-VP64와 협동하여 작용하는 2차 활성화 복합체인 MS2-p65-HSF1 융합 단백질을 암호화하며, 히그로마이신 내성 유전자와 함께 존재한다. 세 번째 플라스미드는 표적 특이적 20nt sgRNA를 암호화하며, 이는 MS2-p65-HSF1 복합체를 활성화 부위로 유인하는 두 개의 MS2 RNA 아파타머와 융합되어 있으며, 푸로마이신 내성 유전자가 함께 포함되어 있습니다. 세 플라스미드는 모든 시스템 구성 요소의 균형 잡힌 발현을 위해 질량비 1:1:1로 전달됩니다.
표적 부위에 조립되면 SAM 복합체는 HDAC4 전사 시작점의 상류 약 200bp 지점에 결합하며, 이곳에서 VP64, p65 및 HSF1이 협력하여 전사 기구를 모집하고 내인성 Histone Deacetylase 4 (HDAC4) 발현의 상향 조절을 유도합니다. 핵산분해 활성을 가진 Cas9과 달리, dCas9은 이중 가닥 절단을 유발하거나 게놈 서열을 변형시키지 않아, 원형 HDAC4 위치를 보존하고 내인성 위치에서 Histone Deacetylase 4 (HDAC4) 의존적 전사 반응을 연구할 수 있게 하여, 기능 연구, 표적 유전자 식별 및 HDAC4 발현이 침묵되거나 감소된 종양 세포에서 Histone Deacetylase 4 (HDAC4) 경로 복원을 모델링하는 데 유용한 도구입니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.