HIG2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403510-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HIG2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HIG2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase HIG2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HILPDA. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HIG2 Anticorpo (G-2): sc-376704
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HIG2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403510-NIC | 20 µg | $410.00 |
HILPDA codifica a proteína associada a gotículas lipídicas induzível por hipóxia (HIG2), uma pequena proteína que se localiza em gotículas lipídicas e é fortemente induzida por hipóxia e por sinais inflamatórios. A HIG2 favorece a adaptação celular a baixos níveis de oxigênio ao promover o armazenamento de lipídios neutros e remodelar o manejo de ácidos graxos, conectando a sinalização de HIF à biogênese de gotículas lipídicas e às respostas ao estresse metabólico. Essa biologia se cruza com vias que controlam a tolerância ao estresse oxidativo, a privação de nutrientes e a ativação da imunidade inata, tornando o HILPDA um ponto útil para estudar a reprogramação metabólica impulsionada pela hipóxia. Alterações na expressão de HILPDA foram relatadas em contextos de hipóxia tumoral, polarização de macrófagos e inflamação associada a doenças metabólicas, nos quais a dinâmica das gotículas lipídicas pode influenciar o estado celular e programas de sobrevivência.
HIG2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HILPDA em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HILPDA. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HILPDA. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HILPDA interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.