Hic-5 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402786

개요

TGFB1I1는 기계적 스트레스에 대한 전사 반응과 인테그린 의존적 신호전달을 연결해 조율하는, 초점부착(focal adhesion) 및 핵에 존재하는 LIM 도메인 어댑터 단백질 Hic-5를 암호화합니다. Hic-5는 액틴 세포골격 재구성, 부착(adhesion) 턴오버, Rho 계열 GTPase 신호전달에 관여하는 단백질 복합체의 스캐폴드로 작용하여 세포의 퍼짐(spreading), 이동(migration), 세포외기질과의 상호작용에 영향을 미칩니다. 또한 섬유화 및 상피-간엽 전이(EMT) 유사 표현형을 형성하는 TGF-β 반응 프로그램과 관련 경로와도 연계됩니다. Hic-5 활성의 이상 조절은 여러 질병 관련 맥락에서 기질(stroma) 재형성 변화와 침습적 세포 행동과 연관되어 왔으며, 인간 세포 모델에서 기계신호전달 및 전사 공동조절 표적으로 활용될 근거를 뒷받침합니다.

Hic-5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 TGFB1I1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 TGFB1I1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 TGFB1I1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Hic-5 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Hic-5 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 TGFB1I1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Hic-5 기능에 중요한 TGFB1I1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 TGFB1I1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Hic-5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Hic-5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 TGFB1I1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Hic-5 HDR 플라스미드 (h) 및 Hic-5 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 TGFB1I1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 TGFB1I1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.