HGF Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400433-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HGFO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HGF (h) e o Plasmídeo Double Nickase HGF (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HGF. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HGFα Anticorpo (H-10): sc-374422
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HGF Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400433-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HGF Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400433-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O fator de crescimento de hepatócitos (HGF) codifica uma citocina pleiotrópica secretada que atua como ligante de alta afinidade do receptor tirosina‑quinase MET. A sinalização HGF–MET ativa as vias PI3K–AKT, RAS–MAPK, STAT e dependentes de adesão focal para regular a sobrevivência celular, a proliferação, a motilidade, a morfogênese e as interações epitélio–mesênquima. Em contextos de lesão tecidual, o HGF contribui para programas regenerativos e para a comunicação cruzada entre estroma e epitélio, que molda a remodelação da matriz extracelular e as respostas angiogênicas. A expressão desregulada de HGF ou a atividade aberrante da via MET está associada à biologia da invasão e metástase oncogênicas, à remodelação fibrótica e a patologias relacionadas à inflamação, tornando o HGF um alvo frequente em estudos mecanísticos de sinalização do microambiente.
HGF O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HGF em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HGF. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HGF. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HGF interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.