HGFα/β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420849
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HGFα/β O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico HGFα/β, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HGFα Anticorpo (H-10): sc-374422
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HGFα/β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420849 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene **Hgf** de camundongo codifica o fator de crescimento de hepatócitos (HGFα/β), um ligante heterodimérico secretado do receptor tirosina-quinase MET que coordena a sinalização epitélio–mesenquimal. A ativação de HGF–MET aciona as vias MAPK/ERK, PI3K–AKT, STAT e Rho GTPases para regular proliferação, sobrevivência, motilidade, morfogênese e reparo tecidual. In vivo e in vitro, a sinalização por HGF influencia o desenvolvimento e a regeneração de órgãos e modula o crosstalk estroma–epitélio no microambiente. A desregulação da sinalização HGF/MET é amplamente estudada em modelos de fibrose, inflamação e progressão do câncer, incluindo invasão, programas angiogênicos e disseminação metastática.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HGFα/β (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Hgf em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Hgf, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Hgf na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HGFα/β.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Hgf para a investigação da sinalização de HGFα/β, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Hgf críticos para a função HGFα/β
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Hgf para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo HGFα/β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo HGFα/β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Hgf. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo HGFα/β Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR HGFα/β (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Hgf para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Hgf definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.