HES3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406281

개요

HES3(hairy and enhancer of split 3)는 기본 나선-고리-나선(bHLH) 계열의 전사 억제인자로, Notch 신호전달의 하위에서 작용하며 세포 운명 결정에 관여하는 유전자 발현 프로그램을 조절합니다. HES3는 신경발생(proneural) 및 분화 관련 전사인자들의 기능을 길항하고 발달 경로로부터의 신호를 통합함으로써, 미분화 상태의 유지와 계통(lineage) 결정의 조절에 기여합니다. 인간 세포에서는 HES 계열의 활성이 변형될 경우 분화 조절 이상, 비정상적 증식, 질환 관련 맥락에서의 줄기세포 유사(stem-like) 표현형과 연관되는 것으로 보고되어, HES3는 발달 프로그램의 전사 조절을 연구하는 데 유용한 핵심 지점으로 활용됩니다. 또한 신경발달 및 전구세포(progenitor) 관련 유전자 네트워크에서의 역할은 신호전달-전사 결합(coupling)과 후성유전적 조절을 탐구하는 연구를 뒷받침합니다.

HES3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 HES3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 HES3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 HES3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 HES3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 HES3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 HES3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• HES3 기능에 중요한 HES3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 HES3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• HES3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 HES3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 HES3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  HES3 HDR 플라스미드 (h) 및 HES3 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 HES3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 HES3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.