Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Heme Oxygenase 1/HMOX1 Double Nickase Plasmid (m): sc-420882-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Heme Oxygenase 1/HMOX1 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Heme Oxygenase 1/HMOX1 Double-Nickase-Plasmid (m) und Heme Oxygenase 1/HMOX1 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Hmox1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Heme Oxygenase 1/HMOX1: sc-390991
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Heme Oxygenase 1/HMOX1 Double Nickase Plasmid (m) | sc-420882-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Heme Oxygenase 1/HMOX1 Double Nickase Plasmid (m2) | sc-420882-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das murine Gen *Hmox1* kodiert die Hämoxygenase 1 (HMOX1), ein induzierbares, stressresponsives Enzym, das den Abbau von Häm zu Biliverdin, Kohlenmonoxid und zweiwertigem Eisen katalysiert und damit den Hämaturnover mit der Redoxhomöostase verknüpft. HMOX1 wird durch Signalwege des oxidativen und elektrophilen Stresses reguliert, insbesondere über die NRF2–KEAP1-Signalkaskade, und ist in inflammatorische sowie mitochondriale Stressantworten eingebunden. Durch die Modulation reaktiver Sauerstoffspezies, der Eisenhandhabung und zytoprotektiver Transkriptionsprogramme beeinflusst HMOX1 die Polarisierung von Makrophagen, die Endothelfunktion und die Gewebeanpassung an Verletzungen. Eine dysregulierte HMOX1-Aktivität wurde in Modellen von Entzündung, Ischämie-Reperfusionsschaden, metabolischer Dysfunktion, Neurodegeneration und Tumorbiologie beschrieben, was sie zu einem nützlichen Ziel für mechanistische Studien macht.
Heme Oxygenase 1/HMOX1 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Hmox1-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Hmox1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Hmox1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Hmox1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.