
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
HAS2 CRISPR 활성화 플라스미드(h) | sc-401032-ACT | 20 µg | $397.00 |
인간 HAS2 유전자는 히알루론산 합성효소 2(hyaluronan synthase 2)를 암호화하며, 이는 세포막에 존재하는 효소로서 히알루론산을 중합합니다. 히알루론산은 조직 수분 유지, 점탄성, 그리고 세포 주변(pericellular) 기질 조립을 조절하는 주요 세포외기질(ECM) 글리코사미노글리칸입니다. HAS2에 의해 유도되는 히알루론산 생성은 CD44 및 RHAMM 신호전달을 통해 세포 접착과 이동 프로그램을 형성하고, 종양 미세환경과 섬유화 간질을 재구성하는 EMT, 염증성 자극, 기계적 신호전달(mechanotransduction) 경로와도 교차합니다. HAS2의 전사 조절은 TGF-β, NF-κB, 그리고 성장인자 신호의 입력을 통합하여, 세포외기질 역학을 증식 및 스트레스 반응 프로그램과 연결합니다. HAS2 활성의 이상 조절과 히알루론산 축적은 암의 침윤과 전이, 섬유증, 혈관 재형성, 그리고 염증성 병리에서 빈번히 연구됩니다.
HAS2 CRISPR 활성화 플라스미드(h)는 기본 DNA 서열을 변경하지 않고 내인성 HAS2 발현을 상향 조절하는 표적화된 비파괴적 접근법을 제공합니다.
HAS2 CRISPR 활성화 플라스미드(h)는 인간 세포주에서 HAS2 유전자좌의 고효율, 위치 특이적 전사 상향 조절을 위해 설계된 3개의 플라스미드로 구성된 시너지 활성화 매개체(SAM) 시스템입니다. 이 시스템은 DNA 결합 능력은 유지하면서 뉴클레아제 활성을 제거하는 두 가지 비활성화 돌연변이(D10A 및 N863A)를 지닌 촉매 활성 없는 Cas9(dCas9)을 중심으로 구축되었습니다. 이 dCas9은 강력한 전사 활성화제인 VP64와 융합되어 있으며, 선별을 위해 블라스티시딘 내성 유전자와 함께 발현됩니다. 두 번째 플라스미드는 dCas9-VP64와 협동하여 작용하는 2차 활성화 복합체인 MS2-p65-HSF1 융합 단백질을 암호화하며, 히그로마이신 내성 유전자와 함께 존재한다. 세 번째 플라스미드는 표적 특이적 20nt sgRNA를 암호화하며, 이는 MS2-p65-HSF1 복합체를 활성화 부위로 유인하는 두 개의 MS2 RNA 아파타머와 융합되어 있으며, 푸로마이신 내성 유전자가 함께 포함되어 있습니다. 세 플라스미드는 모든 시스템 구성 요소의 균형 잡힌 발현을 위해 질량비 1:1:1로 전달됩니다.
표적 부위에 조립되면 SAM 복합체는 HAS2 전사 시작점의 상류 약 200bp 지점에 결합하며, 이곳에서 VP64, p65 및 HSF1이 협력하여 전사 기구를 모집하고 내인성 HAS2 발현의 상향 조절을 유도합니다. 핵산분해 활성을 가진 Cas9과 달리, dCas9은 이중 가닥 절단을 유발하거나 게놈 서열을 변형시키지 않아, 원형 HAS2 위치를 보존하고 내인성 위치에서 HAS2 의존적 전사 반응을 연구할 수 있게 하여, 기능 연구, 표적 유전자 식별 및 HAS2 발현이 침묵되거나 감소된 종양 세포에서 HAS2 경로 복원을 모델링하는 데 유용한 도구입니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.