HARE CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405069

概要

STAB2は、エンドサイトーシス用ヒアルロン酸受容体（HARE）をコードする遺伝子であり、肝類洞内皮細胞および一部のマクロファージ系細胞集団に主として発現する多機能スカベンジャー受容体です。HAREはクラスリン依存的な取り込みとリソソームでのクリアランスを介して、ヒアルロン酸および多様な陰性荷電リガンドを処理し、細胞外マトリックスの代謝回転を受容体介在性エンドサイトーシスおよび血管恒常性と結び付けます。ヒアルロン酸の異化（カタボリズム）制御や循環中グリコサミノグリカンの輸送を通じて、STAB2は炎症シグナル、白血球接着ダイナミクス、ならびに組織リモデリングのプログラムに影響を及ぼします。STAB2活性の変化は、線維化や炎症性疾患の文脈におけるヒアルロン酸の処理異常と関連づけられており、マトリックス生物学およびクリアランス経路研究における機構的ハブとしての有用性を支持します。

HARE CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSTAB2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、STAB2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、STAB2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、HAREタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、HAREシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、STAB2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• HAREの機能に不可欠なSTAB2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、STAB2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• HARE CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびHARE CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、STAB2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  HARE HDRプラスミド（h）および HARE HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSTAB2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSTAB2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。