Date published: 2026-7-15

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HARBI1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-433844-NIC

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Fichas de dados
  • alvos específicos: mouse
  • 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
  • HARBI1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
  • Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
  • Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
  • O Plasmídeo Double Nickase HARBI1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase HARBI1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Harbi1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
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    HARBI1 Plasmídeo duplo de Nickase (m)

    sc-433844-NIC
    20 µg
    $410.00

    Harbi1 codifica a HARBI1, uma proteína domesticada derivada de transposase, implicada na biologia do genoma e na regulação de processos associados ao DNA. Embora as suas funções moleculares ainda não estejam completamente definidas, a HARBI1 tem sido associada a vias relevantes para a reparação do DNA, a dinâmica da cromatina e a manutenção da estabilidade genómica, o que a torna de interesse em estudos sobre o controlo do ciclo celular e respostas ao stress. Em modelos murinos, alterações em fatores de manutenção do genoma podem influenciar fenótipos do desenvolvimento e a aptidão celular; por isso, a HARBI1 é investigada em contextos em que respostas alteradas a danos no DNA ou a regulação da cromatina contribuem para mecanismos relevantes para doenças. Compreender a atividade da HARBI1 apoia a investigação sobre como genes derivados de transposases são reaproveitados para modular a regulação génica em mamíferos e a integridade do genoma.

    HARBI1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Harbi1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Harbi1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Harbi1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

    Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Harbi1 interrompido.

    Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.