G_βL CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-425272

개요

Mlst8는 mTORC1 및 mTORC2 복합체 모두의 핵심 구성요소로서 mTOR 키나아제를 안정화하고 복합체 조립과 신호 출력이 이루어지도록 돕는 GβL(mLST8) 단백질을 암호화합니다. 이러한 복합체를 통해 GβL은 영양분 및 성장인자 감지, 번역 조절, 자가포식, 세포골격 조절에 영향을 미치며, 상위의 PI3K–AKT 및 관련 경로를 통합합니다. 마우스 시스템에서는 Mlst8의 변형을 통해 mTOR 신호전달이 조직과 발달 단계에 따라 세포 성장, 대사, 스트레스 반응을 어떻게 조율하는지 분석합니다. mTOR 경로 활성의 이상은 증식성 및 대사성 질환의 생물학에 광범위하게 연관되어 있어, Mlst8는 경로 의존성과 신호 네트워크 재배선의 기전 연구에 유용한 표적 지점입니다.

GβL CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Mlst8 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Mlst8 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Mlst8의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 GβL 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 GβL 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Mlst8 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• GβL 기능에 중요한 Mlst8 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Mlst8 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• GβL CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 GβL CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Mlst8 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  GβL HDR 플라스미드 (m) 및 GβL HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Mlst8 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Mlst8 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.