G_{α t2} CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-401528

개요

GNAT2는 광변환(phototransduction) 과정에서 활성화된 옵신을 하위 효과기에 연결하는 이형삼량체 G 단백질인 트랜스듀신의 알파 소단위(Gαt2)를 암호화합니다. GPCR 자극을 받으면 Gαt2는 GDP를 GTP로 교환하고 Gβγ로부터 분리되며, 고리형 뉴클레오타이드 신호를 조절해 세포 흥분성과 자극 의존적 반응을 형성합니다. GNAT2는 주로 망막 신호전달 맥락에서 가장 잘 규명되어 왔지만, GPCR–G 단백질 결합, GTPase 사이클 조절, 그리고 cGMP 대사 및 이온 채널 조절과 맞물리는 신호 종료 메커니즘을 연구하기 위한 다루기 쉬운 진입점도 제공합니다. GNAT2의 유전적 교란은 유전성 시기능 이상(시각 장애) 표현형과 연관되어 있어, 감각 신호전달 결함과 경로 보상 기전을 모델링하는 데서의 중요성을 뒷받침합니다.

Gα t2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 GNAT2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 GNAT2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 GNAT2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Gα t2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Gα t2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 GNAT2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Gα t2 기능에 중요한 GNAT2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 GNAT2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Gα t2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Gα t2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 GNAT2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Gα t2 HDR 플라스미드 (h) 및 Gα t2 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 GNAT2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 GNAT2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.