G_{α o} 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-400897-NIC

GNAO1은 인간 이종삼합체 G 단백질의 α 소단위인 Gαo를 암호화합니다. Gαo는 신경계에서 우세한 억제성 G 단백질로, 많은 GPCR을 하위 효과기와 연결합니다. 수용체가 활성화되면 Gαo는 아데닐릴 사이클레이스를 조절하고, βγ 소단위를 통한 신호 전달을 조율하여 이온 채널, 소포 수송, 신경전달물질 방출을 조절함으로써 시냅스 전달과 신경세포 흥분성을 형성합니다. 이 신호 결절은 cAMP 의존성 경로 및 분화와 회로 활동을 제어하는 더 광범위한 GPCR 조절 네트워크와 통합되어 작동합니다. GNAO1 의존성 신호 전달의 이상 조절은 신경발달 및 운동장애 표현형과 연관되어 왔으며, 따라서 신경세포 모델과 신호전달 분석에서 기전 연구의 중요한 표적이 됩니다.

Gα o 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 GNAO1 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 GNAO1 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 GNAO1의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, GNAO1 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.