G_{α o} CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400897

개요

GNAO1은 인간의 이종삼합체 G 단백질 α 소단위인 Gαo를 암호화하며, 뉴런에 풍부하게 발현되는 Gi/o 계열 신호전달의 주요 구성요소로서 활성화된 GPCR을 아데닐릴 사이클레이스 억제 및 이온 채널 조절과 연결합니다. Gαo는 cAMP/PKA 신호, Ca2+ 및 K+ 채널 활성, 그리고 하위 MAPK 및 신경전달물질 방출 경로를 조절함으로써 시냅스 전달, 신경세포 흥분성, 신경망 발달을 형성합니다. GNAO1 기능 이상은 신경발달 및 운동장애 관련 표현형과 연관되어 있어, 세포 및 신경 모델에서 GPCR 구동 신호전달 구조를 탐구하기 위한 핵심 노드로 여겨집니다. GNAO1을 실험적으로 교란하면 수용체 결합 특이성, 2차 전달자 동역학, 활동 의존적 전사 반응에 대한 기전 연구를 뒷받침할 수 있습니다.

Gα o CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 GNAO1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 GNAO1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 GNAO1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Gα o 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Gα o 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 GNAO1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Gα o 기능에 중요한 GNAO1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 GNAO1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Gα o CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Gα o CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 GNAO1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Gα o HDR 플라스미드 (h) 및 Gα o HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 GNAO1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 GNAO1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.