Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Gα 15 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-403266-KO-2
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Gα 15 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h2) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Gα 15, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Gα 15 Anticorpo (F-3): sc-393878
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Gα 15 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) | sc-403266-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
GNA15 codifica a subunidade alfa Gα15 da proteína G heterotrimérica humana, um mediador promíscuo da família Gq que acopla diversos receptores acoplados à proteína G (GPCRs) à ativação da fosfolipase Cβ. Após a ativação do receptor, a Gα15 promove a sinalização por trifosfato de inositol e diacilglicerol, a mobilização intracelular de Ca²⁺, a atividade da proteína quinase C e programas transcricionais a jusante que moldam a secreção, a quimiotaxia e as respostas inflamatórias. Esse eixo de sinalização interage com a via MAPK e outras vias de segundos mensageiros, influenciando estados de ativação celular em contextos imunológicos e hematopoiéticos. Alterações no acoplamento GPCR–Gα15 e a desregulação da sinalização dependente de cálcio têm sido implicadas em fenótipos associados ao câncer e à inflamação, sustentando seu uso em estudos mecanísticos de reconfiguração de receptores e integração de sinais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Gα 15 (h2) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene GNA15 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do GNA15, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do GNA15 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Gα 15.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de GNA15 para a investigação da sinalização de Gα 15, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) GNA15 críticos para a função Gα 15
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos GNA15 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Gα 15 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Gα 15 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus GNA15. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Gα 15 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Gα 15 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia GNA15 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo GNA15 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.