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GSK3 beta双切口酶质粒(h) | sc-400090-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GSK3 beta双切口酶质粒(h2) | sc-400090-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 **GSK3B** 基因编码糖原合酶激酶-3β(GSK3β),这是一种组成型活性的丝氨酸/苏氨酸激酶,能够整合来自生长因子、代谢及应激信号通路的输入。GSK3β 是 PI3K–AKT 信号与 Wnt/β-连环蛋白调控中的关键枢纽,通过依赖磷酸化的机制影响糖原代谢、细胞周期进程、细胞凋亡与分化。它通过调节转录因子与细胞骨架调控蛋白,塑造与神经元功能、胰岛素反应性以及炎症信号相关的多条通路。GSK3B 活性失调及 Wnt/AKT 通路失衡常被用于研究癌症生物学、神经退行性变与代谢性疾病的机制。
GSK3 beta 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 GSK3B 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GSK3B内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏GSK3B的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了GSK3B基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。