GS27 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-406352-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GS27O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GS27 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GS27 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GOSR2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GS27 Anticorpo (F-6): sc-390261
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GS27 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-406352-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GS27 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-406352-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GOSR2 codifica a GS27, uma Qb-SNARE localizada no complexo de Golgi que participa da ancoragem de vesículas e da fusão de membranas na via secretória precoce. A GS27 dá suporte ao tráfego do RE para o Golgi e ao tráfego intra-Golgi ao formar complexos SNARE que garantem a entrega precisa de cargas, a organização do Golgi e a maturação proteica. A disrupção de GOSR2 pode comprometer a glicosilação, a secreção e a proteostase, relacionando o tráfego dependente de GS27 a respostas celulares ao estresse e à homeostase de organelas. Alterações genéticas em GOSR2 têm sido associadas a fenótipos do neurodesenvolvimento e neuromusculares, tornando-o relevante para estudos mecanísticos de disfunções da via secretória.
GS27 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GOSR2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GOSR2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GOSR2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GOSR2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.