Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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GRPR Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401637-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GRPRO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GRPR (h) e o Plasmídeo Double Nickase GRPR (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GRPR. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GRPR Anticorpo (D-1): sc-398549
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GRPR Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401637-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GRPR Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401637-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O GRPR humano (receptor do peptídeo liberador de gastrina) é um receptor acoplado à proteína G que se liga a ligantes da família do peptídeo liberador de gastrina/neuromedina B para ativar a sinalização dependente de PLCβ, a mobilização de cálcio intracelular e respostas a jusante nas vias MAPK/ERK e PI3K. A atividade do GRPR influencia a comunicação entre células epiteliais e neuronais, regulando processos como secreção, contratilidade do músculo liso e sinalização mitogênica. Alterações na expressão ou na sinalização do GRPR já foram relatadas em diversos contextos tumorais e também são relevantes para a biologia neuroendócrina, tornando-o um alvo útil para estudar programas transcricionais conduzidos por GPCR, dessensibilização/internalização do receptor e redes de sinalização dependentes de cálcio.
GRPR O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GRPR em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GRPR. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GRPR. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GRPR interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.