GRP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-432553
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GRP O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico GRP, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GRP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-432553 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene **Grp** de camundongo codifica o **peptídeo liberador de gastrina (GRP)**, um neuropeptídeo que sinaliza principalmente por meio do receptor acoplado à proteína G **GRPR**, regulando o fluxo intracelular de **Ca²⁺** e as vias de sinalização **MAPK/ERK** e **PLC** a jusante. O GRP contribui para a comunicação neuronal, a secreção neuroendócrina e a atividade do músculo liso, e pode influenciar circuitos circadianos e responsivos ao estresse, dependendo do contexto tecidual. Nos sistemas imune e gastrointestinal, a sinalização mediada por GRP tem sido associada à modulação de programas inflamatórios e da fisiologia epitelial. A atividade desregulada do eixo **GRP/GRPR** é frequentemente investigada em modelos de proliferação celular aberrante, neuroinflamação e redes de sinalização associadas a tumores, reforçando sua relevância para pesquisas mecanísticas em doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GRP (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Grp em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Grp, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Grp na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GRP.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Grp para a investigação da sinalização de GRP, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Grp críticos para a função GRP
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Grp para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo GRP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo GRP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Grp. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo GRP Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR GRP (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Grp para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Grp definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.