group IID sPLA₂ CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422283

개요

Pla2g2d는 그룹 IID 분비형 포스포리파아제 A2(sPLA2)를 암호화하며, 이는 세포외 효소로서 막 인지질을 가수분해해 유리지방산과 라이소인지질을 방출하고, 아이코사노이드 및 관련 신호전달 경로로 이어지는 지질 매개체 풀을 형성합니다. 면역 활성과 관련된 마우스 조직에서 그룹 IID sPLA2는 항원제시세포 기능, 사이토카인 프로그램, 그리고 염증 해소(resolution)와 연관된 지질 네트워크를 조절함으로써 염증 수준을 조정하는 데 기여합니다. 아라키돈산의 가용성과 그 하위의 프로스타글란딘/류코트리엔 생합성에 미치는 영향을 통해 Pla2g2d는 인지질 리모델링을 선천 및 적응 면역 간의 상호작용과 연결합니다. 전임상 모델에서는 이 유전자의 발현 또는 활성의 이상이 염증성 병리와 면역 주도성 조직 리모델링에 대한 감수성 변화와 연관되는 것으로 보고되었습니다.

group IID sPLA2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Pla2g2d 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Pla2g2d 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Pla2g2d의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 group IID sPLA2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 group IID sPLA2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Pla2g2d 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• group IID sPLA2 기능에 중요한 Pla2g2d 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Pla2g2d 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• group IID sPLA2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 group IID sPLA2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Pla2g2d 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  group IID sPLA2 HDR 플라스미드 (m) 및 group IID sPLA2 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Pla2g2d 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Pla2g2d 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.