GRIN1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-405452

Übersicht

GPRIN1 (G protein regulated inducer of neurite outgrowth 1) kodiert ein neuronreiches zytoplasmatisches Protein, das mit membranständigen Signalübertragungskomplexen assoziiert und aktivierte G‑Proteine mit dem Umbau des Zytoskeletts koppelt. Es ist an der Neuritenausbildung, der Dynamik von Wachstumskegeln und der synaptischen Plastizität beteiligt, indem es aktinabhängige Prozesse und rezeptornahe Signalereignisse reguliert. GPRIN1 wird mit neuronaler Entwicklung sowie Signalwegen in Zusammenhang gebracht, die die Erregbarkeit beeinflussen, und wird im Kontext neuroentwicklungsbedingter Phänotypen und neurodegenerativer Mechanismen untersucht, bei denen veränderte Neuritenarchitektur und synaptische Funktion zur Krankheitsbiologie beitragen. Diese Eigenschaften machen GPRIN1 zu einem nützlichen Ziel, um die Kopplung von Signalübertragung und Struktur in humanen neuronalen Modellen zu analysieren.

Das GRIN1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des GPRIN1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des GPRIN1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von GPRIN1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die GRIN1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von GPRIN1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der GRIN1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf GPRIN1-Exone abzielen, die für die GRIN1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere GPRIN1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom GRIN1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom GRIN1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des GPRIN1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das GRIN1 HDR-Plasmid (h) und GRIN1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von GPRIN1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten GPRIN1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.