Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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Grim19 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403264
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Grim19 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Grim19, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Grim19 Anticorpo (F-10): sc-365978
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Grim19 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403264 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
NDUFA13 (GRIM19) codifica uma subunidade acessória conservada do complexo I mitocondrial, que dá suporte à fosforilação oxidativa e à transferência adequada de elétrons na cadeia respiratória. Grim19 contribui para a manutenção do potencial de membrana mitocondrial e da bioenergética celular, conectando o metabolismo mitocondrial à homeostase redox e à suscetibilidade à apoptose. Além de seu papel na montagem e na função do complexo I, foi relatado que o GRIM19 interage com programas de transdução de sinais, como a transcrição dependente de STAT3, estabelecendo uma ligação entre o estado mitocondrial e a regulação de genes nucleares. A desregulação de NDUFA13/Grim19 está associada a fenótipos de disfunção mitocondrial e tem sido estudada em contextos nos quais alterações na respiração e na sinalização de estresse contribuem para estados celulares relevantes para doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Grim19 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene NDUFA13 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do NDUFA13, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do NDUFA13 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Grim19.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de NDUFA13 para a investigação da sinalização de Grim19, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) NDUFA13 críticos para a função Grim19
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos NDUFA13 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Grim19 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Grim19 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus NDUFA13. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Grim19 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Grim19 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia NDUFA13 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo NDUFA13 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.