gremlin-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401244-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- gremlin-1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase gremlin-1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase gremlin-1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GREM1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:gremlin-1 Anticorpo (C-7): sc-515877
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
gremlin-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401244-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
gremlin-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401244-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O GREM1 codifica a gremlin-1, uma glicoproteína secretada da família DAN que antagoniza proteínas morfogenéticas ósseas (BMPs), particularmente BMP2, BMP4 e BMP7, moldando assim os efeitos de sinalização das vias TGF-β/BMP. Ao modular a fosforilação de SMAD mediada por receptores, a gremlin-1 regula a comunicação epitélio–mesênquima, a remodelação da matriz extracelular, programas angiogênicos e a especificação de linhagens durante o desenvolvimento e a reparação tecidual. A expressão desregulada de GREM1 tem sido associada à remodelação fibrótica e a alterações na sinalização do estroma, sendo frequentemente estudada no contexto das interações tumor–microambiente e de gradientes morfogenéticos aberrantes na biologia do câncer. Como inibidor difusível de BMP, a gremlin-1 oferece um ponto de intervenção útil para dissecar a sinalização parácrina e a compensação de vias dentro das redes BMP/TGF-β.
gremlin-1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GREM1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GREM1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GREM1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GREM1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.