Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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GRASP55 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401106-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GRASP55O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GRASP55 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GRASP55 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GORASP2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GRASP55 Anticorpo (E-5): sc-271840
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GRASP55 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401106-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GRASP55 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401106-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene humano GORASP2 codifica a GRASP55, uma proteína de empilhamento e reassemblagem do Golgi que ajuda a manter a organização das cisternas do Golgi e dá suporte ao ancoramento de vesículas e ao tráfego de membranas entre o RE e o Golgi. A GRASP55 participa da formação da “fita” do Golgi e está implicada na secreção proteica não convencional, contribuindo para a proteostase e para programas de tráfego adaptativos ao estresse. A perturbação da arquitetura do Golgi dependente de GRASP55 pode alterar a glicosilação, a secreção e a saída de sinalização celular — processos frequentemente remodelados no câncer, na neurodegeneração e em estados inflamatórios. Como resultado, GORASP2 é um lócus útil para investigar como a estrutura do Golgi se relaciona com a homeostase da via secretora e com fenótipos celulares associados a doenças.
GRASP55 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GORASP2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GORASP2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GORASP2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GORASP2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.