GRAMD1B CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-408929

개요

GRAMD1B(GRAM 도메인 함유 1B)는 소포 비의존적 지질 수송에 관여하는 ER(소포체) 고정형 콜레스테롤 전달 단백질로, 소포체–세포막 접촉 부위에서 기능합니다. GRAMD1B는 StART 유사 도메인을 통해 이용 가능한 콜레스테롤에 결합하고, 세포막의 포스포이노시타이드 신호에 반응함으로써 콜레스테롤 항상성, 막 조직화, 지질 의존적 신호전달에 기여합니다. 이러한 과정은 스테롤 감지, ER 스트레스 반응, 그리고 세포 성장과 생존 프로그램에 영향을 미치는 더 광범위한 대사 조절과도 맞물립니다. GRAMD1B의 발현 또는 활성 변화는 지질 대사 이상 및 암 연관 신호전달 맥락에서 연구되어 왔으며, 막 생물학의 기전 연구에서 중요한 표적입니다.

GRAMD1B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 GRAMD1B 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 GRAMD1B 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 GRAMD1B의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 GRAMD1B 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 GRAMD1B 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 GRAMD1B 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• GRAMD1B 기능에 중요한 GRAMD1B 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 GRAMD1B 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• GRAMD1B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 GRAMD1B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 GRAMD1B 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  GRAMD1B HDR 플라스미드 (h) 및 GRAMD1B HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 GRAMD1B 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 GRAMD1B 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.