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GPSM3慢病毒激活颗粒(m) | sc-430655-LAC | 200 µl | $455.00 |
小鼠基因 **Gpsm3** 编码 GPSM3 蛋白,这是一种含 GoLoco 基序的异源三聚体 G 蛋白信号调控因子,能够与结合 GDP 的 Gα 亚基结合,并调节由受体驱动的信号传递。通过精细调控依赖 Gαi 的通路,GPSM3 影响下游第二信使的动态变化,并整合来自趋化因子及其他 GPCR 网络的输入,而这些网络共同控制白细胞的迁移与激活。GPSM3 在免疫细胞谱系中的表达更为富集,因此与炎症信号程序和先天免疫稳态密切相关。与 GPSM3 相关的信号失调已在免疫介导性疾病机制的研究中被关注,使其成为在小鼠模型中解析 GPCR–G 蛋白信号线路的有用靶点。
GPSM3 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Gpsm3 表达。
GPSM3 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Gpsm3转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性GPSM3表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Gpsm3 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。