GPR92 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-436329

Visão geral

Lpar5 codifica o receptor acoplado à proteína G GPR92 (também conhecido como LPA5), um receptor sensor de lipídios que responde ao ácido lisofosfatídico para regular a dinâmica da sinalização intracelular. Em células de camundongo, o GPR92 acopla-se a proteínas G heterotriméricas para modular vias como cAMP/PKA e a remodelação do citoesqueleto dirigida por GTPases da família Rho, influenciando adesão, migração e sinalização inflamatória proximal ao receptor. A atividade de Lpar5 tem sido associada ao comportamento de células imunes e a respostas relacionadas a barreiras, conectando a biologia de mediadores lipídicos à inflamação tecidual e a pistas do microambiente. Assim, a sinalização LPA–GPR92 desregulada é relevante para estudos mecanísticos em imunologia, biologia do câncer e remodelamento associado à fibrose, sem implicar desfechos clínicos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GPR92 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Lpar5 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Lpar5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Lpar5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GPR92.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Lpar5 para a investigação da sinalização de GPR92, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Lpar5 críticos para a função GPR92
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Lpar5 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo GPR92 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo GPR92 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Lpar5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo GPR92 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR GPR92 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Lpar5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Lpar5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.