GPR55 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-432690

개요

마우스 Gpr55는 리소포스파티딜이노시톨과 같은 지질 매개체에 반응하며 엔도카나비노이드 관련 신호 네트워크에서 광범위하게 연구되어 온 고아(orphan) G 단백질 결합 수용체인 GPR55를 암호화한다. GPR55는 Gα12/13 및 Gαq와 결합하고, 하위의 RhoA–ROCK 및 PLCβ–Ca2+ 경로를 활성화하여 세포골격 재구성, 이동, 그리고 MAPK/ERK 신호를 포함한 전사 프로그램에 영향을 준다. 면역 및 기질(stromal) 환경에서 GPR55 활성은 염증성 신호 조절, 파골세포/조골세포 균형, 신경 흥분성 조절과 연관되어 왔다. GPR55 관련 신호의 조절 이상은 통증, 대사 표현형, 골 질환, 염증 연관 조직 재형성 모델에서 연구되어 왔으며, GPCR 경로 연구에서 기전적 핵심 노드로 활용될 수 있음을 뒷받침한다.

GPR55 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Gpr55 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Gpr55 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Gpr55의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 GPR55 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 GPR55 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Gpr55 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• GPR55 기능에 중요한 Gpr55 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Gpr55 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• GPR55 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 GPR55 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Gpr55 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  GPR55 HDR 플라스미드 (m) 및 GPR55 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Gpr55 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Gpr55 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.