GPR126 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407085

Visão geral

ADGRG6 (GPR126) codifica um receptor de adesão acoplado à proteína G que integra sinais da matriz extracelular e de contato célula–célula para regular a sinalização por meio de proteínas G heterotriméricas, incluindo vias dependentes de cAMP/PKA. O GPR126 é um regulador-chave do desenvolvimento e da mielinização de células de Schwann e contribui para a maturação de nervos periféricos, com papéis adicionais na biologia da cartilagem, no crescimento esquelético e no desenvolvimento vascular. Por meio de seu grande domínio extracelular e da autoproteólise no sítio de proteólise de GPCR, o GPR126 influencia programas de sinalização mecanossensíveis e de desenvolvimento. Alterações genéticas e funcionais em ADGRG6 têm sido associadas a fenótipos do neurodesenvolvimento e musculoesqueléticos, sustentando sua relevância para o estudo da mielinização, da diferenciação celular e da morfogênese tecidual.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GPR126 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ADGRG6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ADGRG6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ADGRG6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GPR126.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ADGRG6 para a investigação da sinalização de GPR126, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ADGRG6 críticos para a função GPR126
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ADGRG6 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo GPR126 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo GPR126 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ADGRG6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo GPR126 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR GPR126 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ADGRG6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ADGRG6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.