Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO glypican-5 (h): sc-407289
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- glypican-5 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique glypican-5, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: glypican-5 Antibody (F-3): sc-390838
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO glypican-5 (h) | sc-407289 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Le gène humain **GPC5** code la glypican-5, un protéoglycane à héparane sulfate ancré au glycosylphosphatidylinositol (GPI), localisé à la surface cellulaire, qui façonne la distribution et la puissance de signalisation des morphogènes et facteurs de croissance sécrétés. En se liant à des ligands interagissant avec l’héparane sulfate, la glypican-5 module des voies telles que la signalisation Wnt/β-caténine, Hedgehog et FGF, influençant la prolifération cellulaire, la différenciation et la mise en place des tissus. Son expression et ses altérations génomiques ont été associées à des processus du développement et à des phénotypes liés au cancer, notamment des modifications de la croissance cellulaire et du caractère invasif. En tant que régulateur extracellulaire des interactions ligand–récepteur, **GPC5** est pertinent pour l’étude de la dynamique de transduction du signal et de la signalisation dépendante du microenvironnement.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO glypican-5 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène GPC5 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du GPC5, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert GPC5 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine glypican-5.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en GPC5 pour l'étude de la signalisation de glypican-5, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de GPC5 essentiels à la fonction de glypican-5
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de GPC5 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le glypican-5 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le glypican-5 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus GPC5. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le glypican-5 plasmide HDR (h) et le glypican-5 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie GPC5 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles GPC5 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.