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GluR-2双切口酶质粒(h) | sc-402035-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GluR-2双切口酶质粒(h2) | sc-402035-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GRIA2 编码 AMPA 型离子型谷氨酸受体的 GluR-2(GluA2)亚基,是人脑快速兴奋性突触传递的关键决定因素。GluR-2 在 Q/R 位点的整合与 RNA 编辑可调控钙离子通透性、通道电导以及依赖活动的突触可塑性。GRIA2 参与谷氨酸能信号通路,通过受体转运与突触后致密区(PSD)组织来塑造神经元发育、学习以及神经环路兴奋性。GRIA2 表达或编辑的失调与兴奋—抑制平衡改变有关,并常在神经发育与神经退行性疾病机制研究中被关注。
GluR-2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 GRIA2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GRIA2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏GRIA2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了GRIA2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。