Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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GLUD1 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-402187-NIC
- Target species: human
- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- GLUD1 Double Nickase Plasmid (h) 는 한쌍의D10A mutated Cas9 nuclease 와 타깃특정 20 nt guide RNA (gRNA)를 인코딩하는 plasmid를 포함하고있으며 gRNA는 대응 CRISPR/Cas9 KO보다 높은 특이성을 띤 knockout gene을 발현하도록 디자인되였습니다.
- 한쌍의 gRNA는 약 20bp가량 떨어져 있으며 이는 게놈DNA의 Cas9-mediated double nicking을 발생하여 DSB를 모방합니다.
- 한쌍의 plasmid 중 하나는 selection에 필요한 puromycin-resistance gene을, 다른하나는 형질주입효율을 확인하는 GFP marker를 보유하고있습니다.
- GLUD1 더블 니케이스 플라스미드 (h) 및 GLUD1 더블 니케이스 플라스미드 (h2)는 GLUD1을 표적하는 서로 다른 쌍을 이루는 gRNA 설계를 암호화합니다. 하나 또는 두 가지 디자인 모두 이용 가능할 수 있습니다
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
GLUD1 더블 틈내기효소 플라스미드 (h) | sc-402187-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GLUD1 더블 틈내기효소 플라스미드 (h2) | sc-402187-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GLUD1은 미토콘드리아 글루타메이트 탈수소효소 1을 암호화하는 유전자로, 글루타메이트를 α-케토글루타르산과 암모니아로 가역적으로 산화적 탈아미노화하는 반응을 촉매합니다. 이를 통해 아미노산 분해대사를 삼카복실산(TCA) 회로 및 세포의 생체에너지 대사와 연결합니다. 글루타메이트/α-케토글루타르산 결절을 조절함으로써 GLUD1은 질소 처리, 산화환원 균형, 그리고 산화적 대사를 뒷받침하는 보충(anaplerotic) 플럭스에 영향을 줍니다. 또한 글루타메이트 대사를 ATP 생성과 미토콘드리아 기능에 결합시키는 것을 통해 인슐린 분비와 신경전달물질 항상성을 조절하는 경로들과도 맞물립니다. GLUD1의 조절 이상은 아미노산 대사 장애 및 신경내분비적 표현형과 연관되어 보고되어 왔으며, 인간 세포에서 대사 조절을 연구하는 데 중요한 표적이 됩니다.
GLUD1 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 GLUD1 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 GLUD1 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 GLUD1의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.
편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, GLUD1 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.