GLUD1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402187

개요

GLUD1은 미토콘드리아 글루타메이트 탈수소효소 1(GDH1)을 암호화합니다. GDH1은 NAD(P)+ 의존성 효소로, 글루타메이트를 α-케토글루타레이트와 암모니아로 가역적으로 산화적 탈아미노화하는 반응을 촉매하여 아미노산 대사를 TCA 회로 및 세포의 산화환원 균형과 연결합니다. 글루타민분해(glutaminolysis)와 산화적 대사 사이의 플럭스를 조절함으로써, GLUD1은 미토콘드리아 생물에너지, 질소 처리, 그리고 중심 탄소 대사의 보충(anaplerotic) 재공급에 영향을 줍니다. GDH1 활성의 변화는 인슐린 분비와 흥분성 신경전달물질 항상성에 영향을 미치는 대사 조절 이상과 연관되어 있어, GLUD1은 미토콘드리아 대사 및 신경내분비 신호전달 연구에서 중요한 표적으로 여겨집니다.

GLUD1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 GLUD1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 GLUD1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 GLUD1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 GLUD1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 GLUD1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 GLUD1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• GLUD1 기능에 중요한 GLUD1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 GLUD1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• GLUD1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 GLUD1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 GLUD1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  GLUD1 HDR 플라스미드 (h) 및 GLUD1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 GLUD1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 GLUD1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.