Glucose Transporter Glut6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406852

概要

SLC2A6は、SLC2ファミリーに属する促進拡散型ヘキソーストランスポーターであるグルコーストランスポーターGlut6（GLUT6）をコードしており、細胞へのグルコース取り込みと代謝基質の利用可能性を支えます。GLUT6の発現は免疫系および造血系の細胞系譜で高く、活性化シグナルに応答することから、解糖系、酸化的リン酸化、さらに広範な免疫代謝プログラムの変化と結び付けられています。細胞内の糖流入（炭水化物フラックス）を制御する役割を通じて、GLUT6はレドックスバランス、生合成経路、ならびに栄養状態を細胞の成長や生存に結び付けるAMPKやmTORといったシグナルノードに影響を及ぼし得ます。SLC2A6発現の異常は炎症環境や複数のがんで報告されており、グルコース輸送の変化が腫瘍細胞や免疫細胞の代謝をどのように組み替えるのかを解明する機序研究が進められています。

Glucose Transporter Glut6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSLC2A6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SLC2A6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SLC2A6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Glucose Transporter Glut6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Glucose Transporter Glut6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SLC2A6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Glucose Transporter Glut6の機能に不可欠なSLC2A6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SLC2A6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Glucose Transporter Glut6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびGlucose Transporter Glut6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SLC2A6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Glucose Transporter Glut6 HDRプラスミド（h）および Glucose Transporter Glut6 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSLC2A6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSLC2A6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。