GLI-3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-420577

개요

Gli3는 1차 섬모로부터의 신호를 통합해 발달 관련 유전자 발현 프로그램을 조절하는 Hedgehog 신호전달에서, 상황(맥락)에 따라 활성자 또는 억제자로 기능하는 아연-핑거 전사인자 GLI-3를 암호화합니다. 마우스에서 GLI-3는 PTCH1/SMO 하위에서의 전사 출력(transcriptional output)을 조절하고 GLI 계열 단백질의 활성을 조율함으로써 사지, 신경관, 두개안면 구조의 패터닝에 필수적입니다. GLI-3의 단백질 분해적 가공과 번역 후 조절은 배아 발생 동안 모폴로젠 기울기와 경계 형성을 설정하는 데 기여합니다. Gli3 활성이 비정상적으로 조절되면 선천성 기형과 연관된 표현형이 나타나며, Hedgehog 의존적 조직 항상성과 종양성 경로 재배선(oncogenic pathway rewiring)을 규명하기 위한 모델로 자주 사용됩니다.

GLI-3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Gli3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Gli3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Gli3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 GLI-3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 GLI-3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Gli3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• GLI-3 기능에 중요한 Gli3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Gli3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• GLI-3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 GLI-3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Gli3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  GLI-3 HDR 플라스미드 (m) 및 GLI-3 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Gli3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Gli3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.