GHRH-R Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404197-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GHRH-RO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GHRH-R (h) e o Plasmídeo Double Nickase GHRH-R (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GHRHR. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GHRH-R Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404197-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GHRH-R Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404197-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GHRHR codifica o receptor do hormônio liberador do hormônio do crescimento (GHRH-R), um GPCR de classe B expresso de forma proeminente nos somatotrofos da hipófise anterior, onde se liga ao GHRH hipotalâmico para regular a síntese e a secreção do hormônio do crescimento. A ativação do receptor envolve principalmente a sinalização via Gs–adenilil ciclase, elevando o cAMP e ativando programas transcricionais dependentes de PKA, com acoplamento adicional a vias de MAPK e dependentes de cálcio que influenciam a proliferação e a diferenciação de células endócrinas. Variações na função de GHRHR estão relacionadas à desregulação da atividade do eixo somatotrófico e têm sido associadas a fenótipos de deficiência de hormônio do crescimento e a anomalias do desenvolvimento hipofisário. Em tecidos periféricos e em modelos tumorais, a sinalização GHRH/GHRHR também tem sido utilizada para estudar a transcrição dirigida por cAMP, o controle do ciclo celular e redes parácrinas de fatores de crescimento.
GHRH-R O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GHRHR em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GHRHR. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GHRHR. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GHRHR interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.