GFRαL CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-415831

개요

GFRAL(GDNF 계열 수용체 알파 유사)은 글리코실포스파티딜이노시톨(GPI)로 막에 고정되는 공동수용체를 암호화하며, 특히 스트레스성 사이토카인인 GDF15에 대한 반응에서 RET 수용체 티로신 키나아제에 리간드 특이성을 부여합니다. GFRαL 의존적 RET 신호전달은 하위 MAPK/ERK 및 PI3K/AKT 경로를 활성화하여 대사 및 염증 신호에 대한 세포 반응을 조절하며, 에너지 균형의 신경내분비적 조절과 밀접한 관련이 있습니다. 발현은 후뇌의 특정 신경세포 집단에서 높게 나타나 영양 감지와 전신 항상성 유지에 관여하는 역할을 뒷받침합니다. GDF15–GFRαL–RET 축의 이상 조절은 악액질(cachexia) 유사 표현형, 대사 질환, 암 관련 전신적 영향과 연관되어 왔으며, 따라서 GFRAL은 질환 관련 모델에서 해당 경로를 규명하기 위한 유용한 표적입니다.

GFRαL CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 GFRAL 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 GFRAL 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 GFRAL의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 GFRαL 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 GFRαL 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 GFRAL 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• GFRαL 기능에 중요한 GFRAL 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 GFRAL 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• GFRαL CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 GFRαL CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 GFRAL 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  GFRαL HDR 플라스미드 (h) 및 GFRαL HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 GFRAL 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 GFRAL 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.