GEFT CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406707

개요

ARHGEF25는 GEFT를 암호화하며, GEFT는 Rac1과 Cdc42 같은 Rho 계열 GTPase를 활성화하는 Rho 구아닌 뉴클레오타이드 교환인자(GEF)로서 액틴 세포골격 재구성, 세포 극성, 세포 운동성을 조율합니다. GEFT 매개 신호전달은 초점접착(focal adhesion) 역학, 막 주름 형성(membrane ruffling), 신경돌기(neurite) 성장 등을 조절하는 Rho GTPase 의존성 경로들과 맞물려, 세포외 자극을 하위 전사 프로그램과 형태학적 프로그램으로 연결합니다. Rho GTPase 신호의 이상 조절과 ARHGEF25 활성 변화는 암 생물학에서 비정상적인 이동 및 침윤 표현형과 연관되어 왔으며, 신경발달 및 염증 맥락에서 중요한 세포골격 조직화 결함과도 더 넓게 관련됩니다. 여러 Rho 의존성 효과기들의 상위 노드로서 GEFT는 형태형성, 접착, 신호전달 기전을 규명하기 위해 자주 연구됩니다.

GEFT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 ARHGEF25 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 ARHGEF25 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 ARHGEF25의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 GEFT 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 GEFT 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 ARHGEF25 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• GEFT 기능에 중요한 ARHGEF25 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 ARHGEF25 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• GEFT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 GEFT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 ARHGEF25 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  GEFT HDR 플라스미드 (h) 및 GEFT HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 ARHGEF25 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 ARHGEF25 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.