GDPD3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405288

Visão geral

GDPD3 (domínio contendo fosfodiesterase de glicerofosfodiéster 3) é uma glicerofosfodiesterase humana implicada no catabolismo de fosfolipídios e na remodelação de glicerofosfolipídios, processos que moldam a composição de membranas e a sinalização derivada de lipídios. Ao hidrolisar glicerofosfodiésteres, a GDPD3 pode influenciar os reservatórios celulares de metabólitos que sustentam o tráfego de membranas, a homeostase de organelas e redes metabólicas lipídicas mais amplas. A regulação alterada do metabolismo de glicerofosfolipídios é frequentemente associada a mudanças na proliferação, na adaptação ao estresse e na sinalização relacionada ao sistema imune, tornando a GDPD3 um ponto relevante para estudos mecanísticos de reprogramação metabólica. Alterações de expressão e de atividade em enzimas lipídicas, incluindo a GDPD3, têm sido relatadas em diversos contextos relevantes para doenças, apoiando a investigação de sua contribuição para a desregulação da homeostase lipídica.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GDPD3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene GDPD3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do GDPD3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do GDPD3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GDPD3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de GDPD3 para a investigação da sinalização de GDPD3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) GDPD3 críticos para a função GDPD3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos GDPD3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo GDPD3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo GDPD3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus GDPD3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo GDPD3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR GDPD3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia GDPD3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo GDPD3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.