GDF-10 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406826

개요

GDF10은 성장 분화 인자 10(GDF-10)을 암호화하며, GDF-10은 분비형 TGF-β 초과족 리간드로서 세포 분화 조절, 조직 패터닝, 세포외기질(ECM) 재형성에 관여하는 것으로 알려져 있습니다. GDF-10은 세린/트레오닌 키나아제 수용체를 통해 신호를 전달하여 정형(canonical) SMAD 의존적 전사 프로그램을 활성화하고, 세포 운명 결정과 기질(stroma) 반응을 형성하는 더 넓은 TGF-β/BMP 경로 간 크로스토크와도 교차합니다. 문헌에서는 GDF10 발현의 변화가 조절되지 않은 발달 과정 및 섬유화 및 종양 관련 미세환경과 연관된 비정상적 재형성 프로그램과 연결되는 것으로 보고되어 왔습니다. 시험관 내(in vitro)에서는 GDF-10이 인간 세포 모델에서 계통(lineage) 운명 결정, 이동, 그리고 맥락 의존적 성장 조절에 미치는 영향을 중심으로 자주 연구됩니다.

GDF-10 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 GDF10 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 GDF10 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 GDF10의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 GDF-10 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 GDF-10 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 GDF10 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• GDF-10 기능에 중요한 GDF10 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 GDF10 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• GDF-10 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 GDF-10 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 GDF10 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  GDF-10 HDR 플라스미드 (h) 및 GDF-10 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 GDF10 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 GDF10 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.