GD3 synthase Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-422942-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GD3 synthaseO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GD3 synthase (m) e o Plasmídeo Double Nickase GD3 synthase (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para St8sia1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GD3 Synthase Anticorpo (B-11): sc-390123
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GD3 synthase Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-422942-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GD3 synthase Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-422942-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene murino St8sia1 codifica a sintase de GD3 (ST8SIA1), uma sialiltransferase α2,8 que converte GM3 em GD3 e inicia a biossíntese de gangliosídeos das séries b e c no Golgi. Ao moldar a composição de gangliosídeos na membrana plasmática, a sintase de GD3 influencia a organização de balsas lipídicas (lipid rafts), a sinalização de receptores e processos a jusante, incluindo adesão celular, migração e diferenciação. A atividade de St8sia1 cruza-se com o metabolismo de glicosfingolipídios e com vias imunes e neurais nas quais os gangliosídeos modulam respostas a fatores de crescimento e citocinas. Perfis alterados de gangliosídeos envolvendo GD3 têm sido associados a sinalização desregulada e a programas de estresse celular relevantes para sistemas modelo de neurodesenvolvimento e oncogênese, sustentando seu uso em estudos mecanísticos de glicosilação de membrana.
GD3 synthase O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus St8sia1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de St8sia1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função St8sia1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com St8sia1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.