Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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GCS-β-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403225-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GCS-β-1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GCS-β-1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GCS-β-1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GUCY1B3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GCS-β-1 Anticorpo (G-3): sc-514183
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GCS-β-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403225-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GCS-β-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403225-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GUCY1B3 codifica a subunidade β3 da guanilil ciclase solúvel (sGC-β-1), um receptor-chave para o óxido nítrico que catalisa a conversão de GTP em cGMP. Esse eixo NO–sGC–cGMP regula o relaxamento do músculo liso vascular, a função plaquetária e a neurotransmissão por meio de efetores a jusante, como a proteína quinase dependente de cGMP e as fosfodiesterases, integrando sinais que controlam o tônus celular e a sinalização responsiva ao estado redox. Alterações na sinalização por cGMP e na composição das subunidades da sGC têm sido associadas à biologia cardiovascular e pulmonar, a respostas inflamatórias e à hemostasia desregulada, tornando GUCY1B3 um alvo útil para estudos mecanísticos da transdução de sinal dependente de NO. Em modelos celulares humanos, a perturbação de GUCY1B3 pode ajudar a dissecar como a atividade da sGC contribui para a dinâmica de cGMP e para adaptações transcricionais e metabólicas a jusante.
GCS-β-1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GUCY1B3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GUCY1B3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GUCY1B3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GUCY1B3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.