GCP-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422852

Visão geral

Cxcl5 codifica a proteína quimiotática de granulócitos-2 (GCP-2), uma quimiocina CXC secretada que sinaliza principalmente por meio de CXCR2 para promover a quimiotaxia, a ativação e o recrutamento/tráfego de neutrófilos durante a inflamação aguda. Em tecidos de camundongo, CXCL5 é induzida por estímulos pró-inflamatórios e participa de redes de citocinas e quimiocinas a jusante das vias de sinalização de NF-κB e MAPK, moldando o recrutamento de leucócitos e os microambientes imunes locais. Esse eixo contribui para a regulação de interações com o endotélio, remodelamento tecidual e respostas de defesa do hospedeiro. A sinalização CXCL5/GCP-2 desregulada tem sido associada a patologias inflamatórias e à inflamação associada a tumores, tornando-a relevante para estudos de biologia mieloide, tecidos de barreira e mecanismos de doenças mediadas pelo sistema imune.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GCP-2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cxcl5 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cxcl5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cxcl5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GCP-2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cxcl5 para a investigação da sinalização de GCP-2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cxcl5 críticos para a função GCP-2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cxcl5 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo GCP-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo GCP-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cxcl5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo GCP-2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR GCP-2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cxcl5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cxcl5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.