GCN1L1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-411545-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GCN1L1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GCN1L1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GCN1L1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GCN1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GCN1L1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-411545-NIC | 20 µg | $410.00 |
GCN1 codifica a GCN1L1, um cofator conservado que acopla ribossomos em tradução à resposta integrada ao estresse (ISR), promovendo a ativação da quinase de eIF2α GCN2 durante a limitação de aminoácidos e estresses relacionados. Por meio desse mecanismo de detecção associado ao ribossomo, a GCN1L1 influencia a reprogramação translacional, os desfechos transcricionais dependentes de ATF4 e vias mais amplas de proteostase que se cruzam com a sinalização de nutrientes e a adaptação celular. A desregulação de componentes da ISR, incluindo o eixo GCN1–GCN2, tem sido associada na literatura a alterações da homeostase metabólica, da neurobiologia e a fenótipos celulares ligados ao estresse relevantes para a modelagem de doenças. Como resultado, a GCN1L1 é frequentemente estudada em contextos como respostas à privação de nutrientes, estresse proteotóxico e controle da tradução.
GCN1L1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GCN1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GCN1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GCN1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GCN1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.