GCKR 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-401623-NIC

GCKR는 글루코키나아제 조절 단백질(GKRP)을 암호화하며, GKRP는 간세포에 풍부하게 발현되는 포도당 감지 조절 인자로서 대사 신호에 따라 글루코키나아제(GCK)를 격리하거나 방출함으로써 GCK 활성을 조절합니다. 간의 해당작용 플럭스, 글리코겐 합성, 그리고 de novo 지방생성을 조절하는 과정을 통해 GCKR는 탄수화물–지질 항상성과 인슐린 관련 신호전달의 핵심 균형에 영향을 미칩니다. GCKR의 유전적 변이 또는 발현 변화는 공복 혈당, 중성지방 수치 및 더 광범위한 대사 형질 변화와 연관되어 왔으며, 에너지 균형과 영양소 반응성 전사 프로그램을 연구하는 데 유용한 표적으로 여겨집니다. GCKR에 대한 연구는 관련 세포 모델에서 간 대사, 내분비적 상호작용, 그리고 대사 스트레스 반응을 기전적으로 규명하는 데 기여합니다.

GCKR 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 GCKR 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 GCKR 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 GCKR의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, GCKR 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.