Gas6 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-420490

개요

성장 정지 특이 6(Gas6)는 비타민 K 의존성으로 분비되는 리간드로, 주로 AXL, MERTK, TYRO3로 구성된 TAM 수용체 티로신 키나아제에 결합하여 세포 생존, 증식 및 이동 반응을 조절합니다. TAM 신호전달을 통해 Gas6는 하위 PI3K–AKT, MAPK/ERK, NF-κB 경로에 영향을 미치며, 포스파티딜세린(phosphatidylserine) 의존적 인식을 통해 아폽토시스 세포의 제거(포식성 제거)를 지원합니다. 마우스 시스템에서 Gas6는 선천면역 항상성, 대식세포의 에퍼로사이토시스(efferocytosis), 염증 반응의 전반적 강도 조절에 관여하는 것으로 알려져 있으며, 미세환경에서의 섬유화, 혈전증, 종양–면역 상호작용 등 다양한 과정과 관련이 있습니다.

Gas6 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Gas6 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Gas6 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Gas6의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Gas6 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Gas6 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Gas6 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Gas6 기능에 중요한 Gas6 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Gas6 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Gas6 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Gas6 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Gas6 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Gas6 HDR 플라스미드 (m) 및 Gas6 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Gas6 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Gas6 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.