GalNAc-T13 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407103
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GalNAc-T13 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico GalNAc-T13, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GalNAc-T13 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407103 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
GALNT13 codifica a polipeptídeo N-acetilgalactosaminiltransferase 13 (GalNAc-T13), uma enzima iniciadora residente no Golgi para a O-glicosilação do tipo mucina, que transfere GalNAc para resíduos de serina/treonina em proteínas secretoras e de membrana recém-sintetizadas. Ao moldar os padrões de O-glicanos em receptores, moléculas de adesão e mucinas, a GalNAc-T13 pode influenciar a estabilidade e o tráfego de proteínas, bem como interações com ligantes que impactam processos de sinalização e de comunicação célula–célula. Alterações na expressão de GALNT13 foram relatadas em múltiplos contextos tumorais e estão associadas a mudanças em comportamentos de células malignas, como invasão e potencial metastático, o que é compatível com um papel da O-glicosilação na remodelação da interface extracelular. Assim, este gene é relevante para estudos de biossíntese de glicoproteínas, função da via secretora e redes de sinalização reguladas por glicosilação em células humanas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GalNAc-T13 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene GALNT13 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do GALNT13, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do GALNT13 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GalNAc-T13.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de GALNT13 para a investigação da sinalização de GalNAc-T13, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) GALNT13 críticos para a função GalNAc-T13
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos GALNT13 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo GalNAc-T13 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo GalNAc-T13 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus GALNT13. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo GalNAc-T13 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR GalNAc-T13 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia GALNT13 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo GALNT13 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.