Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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GABAA Rα5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402696-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GABAA Rα5O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GABAA Rα5 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GABAA Rα5 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GABRA5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GABAA Rα5 Anticorpo (A-5): sc-393921
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GABAA Rα5 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402696-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GABAA Rα5 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402696-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GABRA5 codifica a subunidade α5 do receptor humano GABA_A, um canal de cloreto ativado por ligante que medeia a neurotransmissão inibitória no sistema nervoso central. Receptores que contêm α5 são enriquecidos em locais extra-sinápticos e contribuem para a inibição tónica, moldando a excitabilidade neuronal, a integração sináptica e a plasticidade por meio da homeostase do cloreto e da sinalização GABAérgica. Esta subunidade participa na regulação de redes dependente da atividade e interseta-se funcionalmente com vias que governam circuitos de aprendizagem e memória. A desregulação da sinalização de receptores GABA_A contendo α5 tem sido associada a fenótipos neuropsiquiátricos e do neurodesenvolvimento, sustentando a sua utilização em estudos mecanísticos da função de circuitos inibitórios.
GABAA Rα5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GABRA5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GABRA5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GABRA5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GABRA5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.