GABAA Rα3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403044-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GABAA Rα3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GABAA Rα3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GABAA Rα3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GABRA3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GABAA Rα3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403044-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GABAA Rα3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403044-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GABRA3 codifica a subunidade α3 do recetor humano do ácido γ-aminobutírico do tipo A (GABAA Rα3), um componente de um canal de cloreto ativado por ligando que medeia a neurotransmissão inibitória rápida no sistema nervoso central. A incorporação da α3 em recetores GABAA pentaméricos influencia a cinética do canal, a sinalização sináptica versus extra-sináptica e a excitabilidade neuronal, por meio da condução de cloreto e da regulação do potencial de membrana. A sinalização GABAérgica via recetores GABAA integra-se com vias de modulação dependente de fosforilação, tráfego de recetores e organização sináptica que moldam as oscilações de rede e a formação de circuitos durante o desenvolvimento. Alterações na expressão ou na função de subunidades do recetor GABAA, incluindo GABRA3, são estudadas no contexto de fenótipos do neurodesenvolvimento e neuropsiquiátricos e de mecanismos relacionados com crises epiléticas.
GABAA Rα3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GABRA3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GABRA3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GABRA3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GABRA3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.